domingo, 25 de noviembre de 2018

DNA RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA Y DNA RECOMBINANTE ARTIFICIAL

Ejemplo de ADN recombinante en la naturaleza:

“Enzimas recombinasas” que catalizan las reacciones de recombinación natural. RecA, larecombinasa encontrada en Escherichia coli, es responsable de la reparación de las roturas en el ADN de doble hebra. En levaduras y otros organismos eucariotas hay dos recombinasas requeridas para reparar esas roturas. La proteína RAD51 es requerida para la recombinación mitótica y meiótica, y la proteína DMC1 es específica de la recombinación meiótica.


DNA recombinante artificial en la tuberculosis:

El desarrollo de las técnicas del BCG recombinante ha permitido obtener candidatos vacunales que han resultado ser más efectivos que BCG parental en modelos animales. Para ello se han desarrollado varias estrategias: una de ellas es basada en BCGr, para producir grandes cantidades de antígenos autólogos protectores, así como antígenos provenientes de M. tuberculosis, como BCGr que expresa y secreta el antígeno de 30 kDa, la principal proteína secretada por M. tuberculosis. La inmunización con esta cepa que expresa y secreta el antígeno de 30kDa ha resultado en un mayor tiempo de sobrevida que BCG parental, después del reto en el modelo de TB experimental en curieles. 

Fuente de consulta: 


sábado, 10 de noviembre de 2018

PRUEBA DE PCR PARA MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS



T: Uso de PCR específico para la detección de Ile491Phe rpoB (mutante) de Mycobacterium tuberculosis resistente a la rifampicina

O: Diseñar un ensayo de PCR específico de alelo múltiple en tiempo real para identificar la mutación de rpoB Ile491Phe responsable de que Mycobacterium tuberculosis sea resistente a la rifampicina

M: Esputo

AN: DNA genómico

Ex: FastStart SYBR Green Master (ref. 04673484001, Roche)

G: rpoB                Ile491Phe


PCR: Múltiple alelo específico (MAS) PCR
D: 97 °C
H: 56 °C               35 ciclos
E: 65 °C

V: visualización directa porque es en tiempo directo


Fuente de consulta: PCR

domingo, 4 de noviembre de 2018

PRUEBA DE TAMIZAJE Y CONFIRMATORIA PARA TB

PRUEBA TAMIZAJE: 
Prueba cutánea de la tuberculina: Con una aguja muy pequeña, el proveedor de atención médica inyecta un líquido (llamado tuberculina) en la piel, en la parte inferior del brazo. Luego aparecerá en el brazo un pequeño bulto pálido
Prueba de sangre: Hay de dos tipos, la prueba QuantiFERON®–TB Gold In-Tube (QFT-GIT) y la T-SPOT®.TB (T-Spot)

PRUEBA CONFIRMATORIA: 
Esputo + Cultivo para microbacterias: Se le pedirá que tosa profundamente y que escupa la sustancia proveniente de los pulmones (esputo) en un recipiente especial

Imagen relacionada

Fuentes de consulta: